RNAclean Kit

L-sél A-1 atanapi homogénisasi henteu cekap

---- Ngurangan panggunaan sampel, ningkatkeun jumlah panyangga lysis, ningkatkeun homogenisasi sareng waktos lysis.

Jumlah Sampel A-2 ageung teuing

---- Ngurangan jumlah sampel anu dianggo atanapi ningkatkeun jumlah panyangga lysis.

A-1 Lisis sél anu teu cekap atanapi homogénisasi

---- Ngurangan panggunaan sampel, ningkatkeun jumlah panyangga lysis, ningkatkeun homogenisasi sareng waktos lysis.

Jumlah Sampel A-2 ageung teuing

---- Punten tingali kana kapasitas pangolahan anu maksimal.

A-3 RNA henteu dileungitkeun lengkep tina kolom

---- Saatos nambihan cai RNase-Free, kantunkeun sababaraha menit sateuacan dipuseurkeun.

Étanol A-4 dina eluent

---- Saatos dikumbah, centrifuge deui sareng cabut panyangga nyeuseuh sabisa-bisa.

Sedeng budaya sél A-5 henteu lengkep dihapus

---- Nalika ngumpulkeun sél, punten pastikeun ngaleupaskeun medium budaya sabisa-bisa.

A-6 Sél anu disimpen di RNAstore henteu sacara sentrifugip sacara épéktip

---- Kapadetan RNAstore langkung ageung tibatan sedeng budaya sél rata; jadi kakuatan sentrifugal kudu ditingkatkeun. Disarankeun centrifuge dina 3000x g.

A-7 Eusi RNA Rendah sareng kaayaanana dina sampel

---- Anggo sampel positip pikeun nangtoskeun naha ngahasilkeun low disababkeun ku sampel.

A-1 Bahan na henteu seger

---- Jaringan seger kedah disimpen dina nitrogén cair langsung atanapi langsung dilebetkeun kana réagen RNAstore pikeun mastikeun pangaruh ékstraksi.

Jumlah Sampel A-2 ageung teuing

---- Ngurangan jumlah sampel.

A-3 RNase kontaminasin

---- Sanaos panyangga anu disayogikeun dina iket henteu ngandung RNase, gampang pikeun ngotorkeun RNase salami prosés ékstraksi sareng kedah diurus kalayan ati-ati.

Polusi A-4 Éléktroforésis

---- Ganti panyangga éléktroforésis sareng pastikeun bahan habis sareng Loading Buffer bébas tina kontaminasi RNase.

A-5 Teuing muatan kanggo éléktroforesis

---- Ngirangan jumlah beban sampel, muatan masing-masing sumur henteu kedah langkung ti 2 μg.

Jumlah Sampel A-1 ageung teuing

---- Ngurangan jumlah sampel.

A-2 Sababaraha sampel gaduh eusi DNA anu luhur sareng tiasa diubaran ku DNase.

---- Ngalakukeun pangobatan RNase-Free DNase kana leyuran RNA anu diala, sareng RNA tiasa langsung dianggo pikeun ékspérimén salajengna saatos diubaran, atanapi tiasa dimurnikeun deui ku kit pemurnian RNA.

Pikeun gelas, dipanggang dina 150 ° C salami 4 jam. Pikeun wadah palastik, dicelupkeun kana 0,5 M NaOH salami 10 mnt, teras dibilas ku cai bébas RNase teras disterilkeun pikeun ngaleupaskeun RNase. Réagen atanapi solusi anu dianggo dina ékspérimén, khususna cai, kedah bébas tina RNase. Anggo cai bébas RNase pikeun sadaya persiapan réagen (tambahkeun cai kana botol gelas bersih, tambahkeun DEPC kana konsentrasi terakhir 0,1% (V / V), kocok sapeuting sareng autoklaf).